Apa elektroforesis gel polyacrylamide?

Poliakrilamida Gel Elektroforesis

Elektroforesis gel minangka teknik dhasar ing laboratorium ing kabeh disiplin biologi, ngidini pamisahan makromolekul kayata DNA, RNA lan protein. Media lan mekanisme pamisahan sing beda-beda ngidini subset saka molekul kasebut bisa dipisahake kanthi luwih efektif kanthi nggunakake ciri fisike. Kanggo protein khususe, elektroforesis gel polyacrylamide (PAGE) asring dadi teknik pilihan.

PAGE minangka teknik sing misahake makromolekul kayata protein adhedhasar mobilitas elektroforesis, yaiku, kemampuan analit kanggo pindhah menyang elektroda kanthi muatan ngelawan. Ing PAGE, iki ditemtokake dening muatan, ukuran (bobot molekul) lan wangun molekul. Analit pindhah liwat pori-pori sing dibentuk ing gel polyacrylamide. Ora kaya DNA lan RNA, protein beda-beda gumantung saka asam amino sing digabung, sing bisa mengaruhi cara mlaku. Senar asam amino uga bisa mbentuk struktur sekunder sing nyebabake ukuran sing katon lan akibate carane bisa ngliwati pori-pori. Mulane, kadhangkala uga dikarepake kanggo denaturasi protein sadurunge elektroforesis kanggo nggawe linearize yen perlu ngira ukuran sing luwih akurat.

SDS PAGE

Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel elektroforesis minangka teknik sing digunakake kanggo misahake molekul protein kanthi massa 5 nganti 250 kDa. Protein dipisahake mung adhedhasar bobot molekul. Sodium dodecyl sulfate, surfaktan anionik, ditambahake ing nyiapake gel sing nutupi muatan intrinsik saka conto protein lan menehi rasio muatan sing padha karo massa. Ing tembung sing prasaja, denaturasi protein lan menehi muatan negatif.

PAGE asli

Native PAGE minangka teknik sing nggunakake gel non-denaturasi kanggo misahake protein. Ora kaya SDS PAGE, ora ana agen denaturasi sing ditambahake ing nyiapake gel. Akibaté, pamisahan protèin dumadi kanthi basis muatan lan ukuran protèin. Ing tèknik iki, konformasi, lempitan lan ranté asam amino saka protèin minangka faktor sing gumantung saka pamisahan kasebut. Protein ora rusak ing proses iki, lan bisa dibalekake sawise rampung pemisahan.

Kepiye cara kerja elektroforesis gel polyacrylamide (PAGE)?

Prinsip dhasar PAGE yaiku misahake analit kanthi ngliwati pori-pori gel polyacrylamide nggunakake arus listrik. Kanggo entuk iki, campuran acrylamide-bisacrylamide dipolimerisasi (polyacrylamide) kanthi tambahan amonium persulfate (APS). Reaksi kasebut, sing dikatalisis dening tetramethylethylenediamine (TEMED), mbentuk struktur kaya jaring kanthi pori-pori sing bisa diobahake analit (Gambar 2). Sing luwih dhuwur persentase total acrylamide sing kalebu ing gel, ukuran pori sing luwih cilik, mula luwih cilik protein sing bisa dilewati. Rasio acrylamide kanggo bisacrylamide uga bakal mengaruhi ukuran pori nanging iki asring tetep konstan. Ukuran pori sing luwih cilik uga nyuda kacepetan protein cilik bisa ngliwati gel, ningkatake resolusi lan nyegah supaya ora mlayu menyang buffer kanthi cepet nalika ditrapake.

Peralatan kanggo Elektroforesis Gel Polyacrylamide

Sel Elektroforesis Gel (Tank/Kamar)
Tangki gel kanggo elektroforesis gel polyacrylamide (PAGE) beda karo tangki gel agarose. Tangki gel agarose horisontal, dene tangki PAGE vertikal. Miturut sel elektroforesis vertikal (tangki / kamar), gel tipis (biasane 1.0mm utawa 1.5mm) diwutahake ing antarane rong piring kaca lan dipasang supaya bagian ngisor gel dicelupake ing buffer ing siji kamar lan ndhuwur dicelupake ing buffer. ing kamar liyane. Nalika saiki wis Applied, jumlah cilik saka buffer migrasi liwat gel saka kamar ndhuwur kanggo kamar ngisor. Kanthi clamps kuwat kanggo njamin Déwan tetep ing posisi mujur, peralatan nggampangake gel mlaku cepet karo malah cooling asil ing bands béda.

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) ngasilake macem-macem ukuran sel elektroforesis gel polyacrylamide (tank/kamar). Model DYCZ-20C lan DYCZ-20G minangka sel elektroforesis vertikal (tank/kamar) kanggo analisis urutan DNA. Sawetara sel elektroforesis vertikal (tangki/kamar) kompatibel karo sistem blotting, kayata model DYCZ-24DN, DYCZ-25D lan DYCZ-25E kompatibel karo model sistem Western Blotting DYCZ-40D, DYCZ-40G lan DYCZ-40F, sing digunakake kanggo nransfer molekul protein saka gel menyang membran. Sawise elektroforesis SDS-PAGE, Western Blotting minangka teknik kanggo ndeteksi protein tartamtu ing campuran protein. Sampeyan bisa milih sistem blotting iki miturut syarat eksperimen.

Sumber Daya Elektroforesis
Kanggo nyedhiyakake listrik kanggo nglakokake gel, sampeyan butuh sumber daya elektroforesis. Ing Liuyi Biotechnology, kita nyedhiyakake macem-macem pasokan listrik elektroforesis kanggo kabeh aplikasi. Model DYY-12 lan DYY-12C kanthi voltase stabil dhuwur lan saiki bisa nyukupi elektroforesis syarat voltase dhuwur. Nduwe fungsi ngadeg, wektu, VH lan aplikasi langkah-langkah. Padha becik kanggo aplikasi elektroforesis urutan IEF lan DNA. Kanggo aplikasi elektroforesis protein lan DNA umum, kita duwe model DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, lan liya-liyane, sing uga dadi sumber daya dodolan panas karo sel elektroforesis (tank / kamar). Iki bisa digunakake kanggo aplikasi elektroforesis voltase tengah lan kurang, kayata kanggo panggunaan laboratorium sekolah, laboratorium rumah sakit lan liya-liyane. Model liyane kanggo pasokan listrik, bukak situs web kita.

Merek Liuyi duwe sejarah luwih saka 50 taun ing China lan perusahaan kasebut bisa nyedhiyakake produk sing stabil lan berkualitas ing saindenging jagad. Liwat pembangunan taun ', iku pantes pilihan!

Kanggo informasi luwih lengkap babagan kita, hubungi kita liwat email[email dilindhungi] or [email dilindhungi].

Referensi kanggo Apa elektroforesis gel polyacrylamide?
1. Karen Steward PhD Elektroforesis gel Polyacrylamide, Cara Kerja, Varian Teknik, lan Aplikasi