Prinsip
Elektroforesis film selulosa asetat minangka metode elektroforesis nggunakake film selulosa asetat minangka dhukungan. Fenomena ing ngendi partikel sing diisi daya pindhah menyang elektroda sing ngelawan miturut tumindak medan listrik diarani elektroforesis. Amarga saben protein duwe titik isoelektrik tartamtu, yen protein diselehake ing larutan kanthi pH luwih murah tinimbang titik isoelektrik, protein kasebut bakal diisi kanthi positif lan pindhah menyang elektroda negatif. Kosok baline, pindhah menyang kutub positif. Amarga kacepetan molekul protein sing obah ing medan listrik ana hubungane karo muatan, wangun lan ukuran molekul, protein sing beda bisa dipisahake kanthi elektroforesis. Serum ngemot macem-macem protein, kabeh duwe titik isoelektrik ing pH7,5 utawa kurang. Nalika serum diselehake ing buffer pH 8.6 kanggo nglakokake elektroforesis, kabeh protèin serum diisi daya negatif lan bakal pindhah menyang sisih positif ing medan listrik. Amarga macem-macem protein serum duwe muatan sing beda ing pH sing padha, ukuran partikel molekul beda-beda, lan kanthi mangkono kacepetan migrasi beda, lan dipisahake kanthi elektroforesis. Titik isoelektrik lan bobot molekul protein serum ditampilake ing tabel ing ngisor iki:
| Protein | Titik isoelektrik (PI) | Bobot molekul |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000~150 000 |
| γ-gloulin | 6.85~7.50 | 156 000~ 300 000 |
Eksperimen kasebut yaiku misahake macem-macem protein ing serum getih kanthi membran selulosa asetat (abbr. CAM) minangka media pendukung. CAM minangka jenis loos foamedefilm karo seragam apik, lan kekandelan punika 0.1mm-1.5mm, kang wis panyerepan banyu tartamtu.
Bahan, instrumen lan reagen kanggo CAM Electrophoresis
Sampel:serum getih manungsa sing sehat
Instrumen:catu daya DYY-6C, tangki elektroforesis DYCP-38C, pemuatan sampel unggul WD-9404
Reagen
1) membran selulosa asetat 7X9cm
2) PH 8,6 solusi buffer barbitol (kekuwatan ion 0,05-0,09, iku wektu 0,06tid.): njupuk 1,84g asam Diethyl barbituric, lan banjur njupuk 1,03g Diethyl sodium pentobarbital, nambah sawetara banyu disaring panas kanggo dissolve, lan nggawe nganti 1000 ml;
3) Werna: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, nambah 100ml banyu suling;
4) TBS / T utawa PBS / T: 45ml 95% etanol, 5ml asam asetat glasial, nambah 50ml banyu suling;
5) Solusi Reresik: 70ml etanol anhidrat, 30ml asam asetat glasial.
Metode Eksperimend
1) Siapke membran: Kacemplungaken membran menyang barbitol solusi buffer 30min-8h, lan njupuk metu, mbusak solusi ekstra dening kertas absorbent.
2) Loading sampel: Mbedakake sisih atos lan Gamelan sisih membran, lan tandha baris ing 1,5cm kadohan kanggo mburi ndhuwur ing sisih atos. Muat sampel kanthi alat loading sampel sing unggul ing sisih kasar. Cathetan: Sampel kudu dimuat ing sisih membran sing kasar. Sawise sampel serum wis ditembus kanthi lengkap menyang membran, nguripake membran, sijine sisih kasar (karo conto) madhep menyang tank, lan pungkasan karo conto diselehake ing elektroda negatif.
3) Elektroforesis: Nguripake sumber daya, 0.4～0.6m A/cm membran, wektu mlaku 30-45 min. Sawise mlaku elektroforesis, mateni daya.
4) Noda lan resik: Copot membran saka tank, lan kacemplungakeit menyang larutan pewarna kanggo 5 menit, banjur resiki ing solusi reresik bola-bali 3-4 kaping nganti werna latar mburi cetha. Protein serum kudu ditampilake ing pita, lan biasane ana limang zona, mbentuk ujung ndhuwur garis sing ditandhani, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Pengawetan: sijine electrophoresis garingbanding solusi reresik kanggo 10-15 menit, banjur njupuk metu lan nempel ing kaca resik, sawise iku garing, iku bakal dadi film transparent.band.
Eksperimenasil
Efek pamisahan sampel serum apik, lan ora ana fenomena band tailing. Baleni asil beda-beda amarga prosedur tes lan metode eksperimen, lan tingkat pengulangan dhuwur.
Kesimpulan
Sistem deteksi elektroforesis klinis cepet (Tangki elektroforesisDYCP-38C,sumber dayaDYY-6C lan loading sampel unggul WD-9404) diprodhuksi dening kitaPerusahaan Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdnyukupi syarat eksperimen,lanasil reproducible, prasaja lan cepet, cocok kanggopiwulangriset.
Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd spesialisasi ing manufaktur produk elektroforesis kanggo industri ilmu urip, singduwe sejarah luwih saka 50 taun ing China lan perusahaan bisa nyedhiyakake produk sing stabil lan berkualitas ing saindenging jagad. Liwat taun pembangunan, iku pantes pilihan sampeyan!
We are saiki looking for partners, loro OEM tank elektroforesis lan distributor tampi.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan kita, hubungi kita liwat email[email dilindhungi]utawa[email dilindhungi].
Wektu kirim: Nov-14-2022