1. Klasifikasi
Elektroforesis gel dipérang dadi jinis vertikal (kalebu gel kolom lan gel slab) lan jinis horisontal (utamané gel slab) (Gambar 6-18). Umumé, pemisahan vertikal rada unggul tinimbang horisontal, nanging persiapan gel horisontal paling ora ana papat kaluwihan: ana dhukungan ing ngisor kabeh gel, saéngga nggunakake agarose konsentrasi rendah; bisa nyiyapake piring gel agarose kanthi spesifikasi sing beda; preparation gel lan loading sampel luwih trep; kamar elektroforesis gampang kanggo mbangun lan biaya-efektif. Wiwit elektroforesis horisontal ditindakake kanthi piring gel agarose kanthi lengkap babagan 1mm ing ngisor permukaan buffer elektroforesis, uga diarani elektroforesis submerged.
Tangki Elektroforesis DYCP-31DN kanggo elektroforesis gel agarose
2. Sistem Buffer
Ing pamisahan asam nukleat, umume sistem nganggo sistem terus-terusan. Buffer elektroforesis sing umum digunakake kalebu TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L boric acid, 0.0024mol/L EDTA) buffer lan THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L natrium asetat, 0,0018mol/L EDTA) buffer. Buffer iki umume disiapake minangka solusi saham 10x lan diencerke nganti konsentrasi sing dibutuhake nalika digunakake. Tingkat migrasi DNA linear lan bunder ing gel agarose beda-beda gumantung saka buffer sing digunakake. Ing buffer THE, tingkat migrasi DNA linear luwih gedhe tinimbang DNA bunder, dene ing buffer TBE, sebaliknya.
3. Preparation saka Agarose Gel
(1) Preparation saka Horizontal Agarose Gel
(a) Siapke konsentrasi gel agarose sing dibutuhake nggunakake buffer elektroforesis 1x.
(b) Panaskan agarose kanggo ngrampungake pembubaran ing adus banyu sing nggodhok, ing pengaduk magnetik, utawa ing gelombang mikro. Dinginake larutan agarose nganti 55°C lan tambahake pewarna etidium bromida (EB) nganti konsentrasi akhir 0,5 μg/ml.
(c) Segel pinggiran kaca utawa piring akrilik kanthi gel agarose cilik, tambahake sisir, lan pasang untu sisir udakara 0,5 ~ 1,0 mm ing ndhuwur piring.
(d) Tuang larutan gel agarose sing ilang terus-terusan menyang cetakan piring kaca utawa akrilik (kekandelan gumantung saka volume sampel DNA), supaya ora mlebu gelembung udara. Ayo dadi solidify kanthi alami ing suhu kamar.
(e) Copot sisir kasebut kanthi teliti sawise solidifikasi lengkap. Tambah jumlah cocok saka elektroforesis buffer menyang tank gel, mesthekake yen piring gel wis submerged bab 1 mm ngisor lumahing elektroforesis buffer.
(2) Persiapan Gel Agarose Vertikal
(a) Copot pelumas utawa residu saka piring kaca kanthi ngumbah nganggo etanol.
(b) Selehake piring spacer ing antarane bendungan ngarep lan mburi, selarasake pinggiran piring spacer karo bendungan ngarep lan mburi, lan kenceng nganggo klem.
(c) Tambah 2% agarose ing 1x buffer antarane pinggiran piring spacer kanggo mbentuk plug agarose dhuwur 1 cm ing ngisor kamar casting gel.
(d) Tuangake gel agarose sing ilang ing konsentrasi sing dikarepake, disiapake ing 1x buffer, menyang ruang gel nganti 1 cm ing sisih ndhuwur.
(e) Lebokake sisir, supaya ora kepepet gelembung udara ing ngisor untu sisir. Kadhangkala, kisut bisa katon ing untu sisir sajrone pendinginan gel agarose; ing kasus kaya mengkono, mung nambah sawetara agarose ilang ing ndhuwur kanggo ngalangi.
(f) Copot sisir. Kanggo nyegah bocor buffer ing slot loading, segel sambungan antarane piring gel agarose lan kamar elektroforesis karo 2% agarose lan nambah jumlah buffer sing dibutuhake.
(g) Tambah 1x buffer elektroforesis menyang ruang gel.
(h) Isi sampel DNA kanthi ati-ati ing gel agarose ing sangisore buffer.
Informasi liyane babagan kawruh dhasar babagan elektroforesis gel agarose, kita bakal nuduhake minggu ngarep. Muga-muga informasi kasebut bisa migunani kanggo eksperimen sampeyan.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) duwe spesialisasi ing manufaktur instrumen elektroforesis luwih saka 50 taun karo tim teknis profesional lan pusat R&D. Kita duwe lini produksi sing dipercaya lan lengkap saka desain nganti inspeksi, lan gudang, uga dhukungan pemasaran. Produk utama kami yaiku Sel Elektroforesis (tangki/ruangan), Sumber Daya Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Gambar & Analisis Gel dll.
We are saiki looking for partners, loro OEM tank elektroforesis lan distributor tampi.
Yen sampeyan duwe rencana tuku produk, aja ragu-ragu hubungi kita. Sampeyan bisa ngirim pesen ing email[email dilindhungi]utawa[email dilindhungi], utawa monggo nelpon kita ing +86 15810650221 utawa nambah Whatsapp +86 15810650221, utawa Wechat: 15810650221.
Mangga Pindai kode QR kanggo ditambahake ing Whatsapp utawa WeChat.
Wektu kirim: Dec-07-2023